Le quatuor de base est composé de 4 chanteurs permanents, dont un contre-ténor, deux ténors et une basse. Notre formation se veut modulable et ayant la possibilité de s'adjoindre de voix supplémentaires et d'instruments suivant le programme.                                                                                         

De nombreux chanteurs se sont succédés au fil des prestations. Actuellement, l'Ensemble Hortus Conclusus est composé des chanteurs suivants:

Martin Steinmann (ténor 2), Vincent Oberson (ténor 1), Yvan Pochon (basse) et Laurent Dietrich (contre-ténor)

Issus de la Maîtrise de Fribourg et de la Maîtrise de Bulle, chacun a pu diversifer ses expériences en chantant dans différentes formations, dont notamment le choeur des vêpres de la Cathédrale St-Nicolas de Fribourg, L'Accroche-Choeur ensemble vocal Fribourg, le choeur d'Air France et l'Ensemble vocal Orlando.